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土壤菌群的测定
发布时间:2019-04-23   点击次数:204次

       接下来喆图小编给大家讲讲用电热恒温培养箱进行水中土壤菌群的测定
       本方法适用于工业冷却水中土壤菌群的测定,也适用于原水、生活用水及其他水中土壤菌群的测定.基本方法是采用混合培养基,利用平皿计数技术,在电热恒温培养箱中培养72小时,测定循环冷却水中土壤菌群的总数。下面喆图小编给大家介绍一下具体步骤。
测定步骤

水样的采集

       用无菌采样瓶采集被测样品,在采样过程中,要保护瓶口和瓶颈,防止这些部分受杂菌污染。瓶内要留下足够的空间,以备测定之前摇晃。

       若采集的水中有余氯,应于采样前在无菌操作下于无菌采样瓶中加人灭过菌的硫代硫酸钠,加人量为每升水样约0.1g。

       水样采集后应立即进行测定,如果2h内不能进行测定,应把水样放在冰箱中,于4℃~10℃保存,保存时间不宜超过24h。经冷冻保存后的水样需测定时,从冰箱中取出于30℃左右活化4h~5h,再进行测定。

       无菌箱(室)灭菌,把实验所用的无菌稀释水、无菌培养皿、无菌吸管等用品放人无菌箱(室)内,打开紫外线灯灭菌30min。

       水样的稀释和接种,关掉紫外线灯,打开荧光灯,将待测水样放人无菌箱(室)中,立即用75%的乙醇溶液浸泡的医用脱脂棉球擦手,点燃无菌箱(室)内的酒精灯。

       以下对水样的稀释和接种条的操作应在无菌室内的火焰区进行。

       选择适宜的稀释度,应使MAX后一个稀释度接种后培养皿中生长的菌落数小于300个,在空白稀释水样瓶上标上稀释度数。

       用10倍稀释法稀释水样,即用5mL无菌吸管吸取5mL水样注入到45mL空白稀释水中充分摇匀,此时稀释度为10-1.

       另取一支5mL无菌吸管吸取5mL10-1水样移人到第二个稀释水中,充分摇匀,此时稀释度为10~2,依次类推,直至需要的稀释度为止。

       将不同稀释度的水样分别接种到无菌培养皿中,每个稀释度重复接种3~5个皿,每皿接种1mL,接种时左手掌托住培养皿,大拇指和食指轻轻将培养皿提起,吸管与培养皿底成45°角相接。移开吸管时吸管不宜再碰到培养皿。接种时间不宜超过4s。每接种一个稀释度更换一支无菌吸管。另取一组培养皿不接水样,作为空白。同时操作。

       将灭过菌的培养基冷却至(45士1)℃,掀开培养皿盖,将培养基灌入培养皿内,每皿应灌15mL~20mL。灌皿时不要使培养基直接灌在水样上,灌皿后要将融化的培养基和皿中水样彻底混合, 小心勿使混合液溅到培养皿的边缘, 测定一个水样从接种到灌皿不得超过20min。

培养

       待培养皿中培养基固化后,倒置平皿,在电热恒温培养箱中29℃培养72h。

       以上内容由喆图小编编辑发布,仅供参考,如需了解电热恒温培养箱详情请联系喆图客服

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