诺卡菌属与放线菌属

        放线菌(Actinom ycete）是以分裂方式繁殖、常形成分枝状无隔营养菌丝的原核细胞型微生物。大多数对人不致病，致病的放线菌可分为含有分枝菌酸和不含分枝菌酸两类：诺卡菌属含有分枝菌酸；放线菌属不含分枝菌酸。

        一、诺卡菌属

        诺卡菌属(Nocard ia )有很多个菌种，广泛分布于土壤中，不属于人体正常菌群。能引起人和动物疾病的主要是星形诺卡菌（N. asteroides）和巴西诺卡菌（N. brasiliensis)。

        （一）生物学特性

        ⒈形态结构 诺卡菌为革兰阳性杆菌，有细长的分枝菌丝，形态与放线菌属相似，但菌丝末端不膨大，在培养早期分枝状菌丝较少，多为球状或杆状；若培养时间延长则可见有丰富的菌丝形成．菌丝呈粗细不等的串珠状。在患者痰、脓液、脑脊液等标本直接涂片中多见纤细的分枝状菌丝。抗酸染色弱阳性，延长脱色时间可失去抗酸性，可与结核分枝杆菌相区别。

        ⒉培养特性诺卡菌为专性需氧菌，营养要求不高，在普通培养基或沙氏培养基上于电热恒温培养箱内22℃或35℃均可生长。但繁殖速度慢，一般需1周左右才能形成肉眼可见的菌落，菌落表面干燥、有皱褶或呈颗粒状，可产生橙红色、黄色、绿色等不同色素。星形诺卡菌为黄色或深橙色，表面无白色菌丝，巴西诺卡菌菌落表面有白色菌丝生长。在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色。诺卡菌在液体培养基表面形成菌膜，下部液体澄清。

        ⒊生化反应触酶阳性，分解葡萄糖，大部分菌种水解七叶苷、尿酶和硝酸盐还原阳性。

        （二）临床意义

        诺卡菌属多引起外源性感染，星形诺卡菌主要通过呼吸道感染引起原发性、化脓性肺部感染，症状类似肺结核，易通过血行播散，引起脑脓肿、腹膜炎等。若经皮肤创伤感染，可侵入皮下组织引起慢性化脓性肉芽肿，形成瘘管。从瘘管中流出的脓液可见小的色素颗粒，为诺卡菌的菌落。巴西诺卡菌可因外伤侵入皮下组织引起慢性化脓性肉芽肿，表现为脓肿和多发性瘘管，好发于足、腿部，称为足分枝菌病（mycetoma)。

        (三）微生物学检验

        ⒈标本采集采集组织渗出液、痰液、脓液等。

        ⒉直接显微镜检查寻找标本中的色素颗粒，置于载玻片上压碎，进行革兰染色和抗酸染色，镜检可见有革兰阳性（有时染色性不定）纤细的菌丝体和长杆菌，抗酸染色呈弱抗酸性若在脑脊液或痰液中发现抗酸性的长杆菌，应注意与结核分枝杆菌相鉴别。

        ⒊分离培养将标本接种于沙氏培养基和血琼脂平板上，电热恒温培养箱35℃培养2～4天后可见有黄色、橙色或红色的菌落。星形诺卡菌MAX高生长温度可达45℃，为本菌鉴定要点之一。

        ⒋鉴定根据菌体形态、菌落特征，进一步作生化反应鉴定。星形诺卡菌与巴西诺卡菌的主要鉴别要点：巴西诺卡菌能液化明胶、分解酪氨酸和胨化牛乳，星形诺卡菌均为阴性，星形诺卡菌45℃可以生长，巴西诺卡菌45℃不生长。

        二、放线菌属

        放线菌属（Actinomyces）是寄居在人和动物口腔、上呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道中的正常菌群。临床常见的有衣氏放线菌(A.israelii),黏性放线菌（A.viscosus )、内氏放线菌(A．naesluizdii)和溶齿放线菌（A. odontol yticus)等。其中对人致病性较强的主要为衣氏放线菌。牛放线菌(A. bovis）主要引起牛的放线菌病。放线菌多引起内源性感染，一般不在人群及人与动物间传播。

        (一）生物学特性

        ⒈形态结构放线菌为直或略弯曲的杆菌，具有多形性，宽可不足1 um，长可达10～50um或更长。有分枝的丝状体是放线菌属的重要特征，菌丝断裂形成长短不一的杆状，偶见球杆状或细胞末端膨大的菌体，可单个、成对、呈短链或小团状排列。为革兰阳性，但着色不规则，可呈珠状或条纹状。无抗酸性，不产生胞子。在脓液标本中菌丝缠绕成团，形成“硫黄颗粒”(sulfur granule)，它是放线菌在组织中形成的菌落。

        ⒉培养特性放线菌培养比较困难，厌氧或兼性厌氧，多数菌种在厌氧环境生长更好。二氧化碳可促进其生长。在厌氧血琼脂平板上，37℃培养3～7天后可形成中等大小、光滑或粗糙两种类型的菌落。①光滑型菌落：圆形、白色、不透明、有光泽的菌落，个别菌种从厌氧环境移至大气中可出现红色菌落。②粗糙型菌落：如脑回状、臼齿形，或面包屑样，菌落粘连紧，不易挑起，或易碎。衣氏放线菌在牛心脑浸液琼脂培养基上，37℃厌氧培养18～24天，形成微型菌落，菌落直径为0.03～0.06 mm,显微镜观察可见菌落由长短不等的蛛网状菌丝构成，称为蛛网状菌落，继续培养7～14天后，菌落直径达0.5～3 mm，呈圆形，白色或灰白色，不溶血，无气中菌丝，呈臼齿型、面包屑样菌落，黏于琼脂表面，不易挑起和乳化。

        ⒊生化反应能分解葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇和麦芽糖，产酸不产气，水解七叶苷，不水解淀粉，触酶阴性。牛放线菌与衣氏放线菌的不同之处是水解淀粉，不能将硝酸盐还原为亚硝酸盐。

        （二）临床意义

        放线菌常存在干正常人口腔及与外界相通的腔道中，当机体抵抗力减弱、口腔卫生不良、拔牙或外伤时可引起内源性感染，导致软组织的化脓性炎症。若无继发感染大多呈慢性无痛性过程，并常伴有多发性瘘管形成，排出“硫黄颗粒”是其特征，称为放线菌病。

        放线菌感染可涉及多种组织器官，如面颈部、胸部、腹部、盆腔和中枢神经系统等感染，其中以面颈部感染MAX常见，大多近期有口腔炎、拔牙史或下领骨骨折后颈面部肿胀等，不断产生新结节、多发性脓肿和形成瘘管。胸部感染常有吸入史，也可由颈面部感染通过血行传播，开始在肺部形成病灶，损害大多连续蔓延，可扩展到心包、心肌，并能穿破胸膜和胸壁，在体表形成多发性瘘管，排出脓液。

        （三）微生物学检验

        ⒈标本采集采集局部病灶组织、窦道及瘘管脓液、痰液等，仔细寻找肉眼可见的“硫黄颗粒”。

        ⒉直接显微镜检查将“硫黄颗粒”制成压片，在显微镜下观察，可见有放射状排列的棒状或长丝状菌体，边缘有透明发亮的棒状菌鞘，呈菊花状。用革兰染色可见中央部分菌丝体为革兰阳性，分枝状菌丝排列不规则，四周放射状的肥大菌鞘可呈革兰阴性。脓液涂片中内氏放线菌显微镜下形态特征。  

        ⒊分离培养标本接种于厌氧血琼脂平板、牛心脑浸液琼脂培养基，置于厌氧培养箱、37℃培养。