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用恒温培养箱监控细胞培养中的污染

更新时间:2022-03-28  |  点击率:690

  大家都了解,细胞培养过程中难免会出现污染,小喆讲解一下细胞污染如何鉴定。
  细胞培养是生物医学研究的常见操作,其中避免细菌污染是重要一环。细胞是否干净,直接关系到实验结果稳定性的好坏。
  一般情况下细胞实验过程中出现的常见污染主要有:细菌污染、真菌污染和支原体污染。每种情况又分别有不同的症状和解决方法。
  我们将分三篇文章,简要概述三种不同污染的症状及处理方法。
  细菌概述
  细菌是一种原核细胞微生物,一般为微米级别。细胞培养过程中常见的污染菌为大肠杆菌、葡萄球菌
、假单胞菌等。
  细菌污染症状
  与其他污染相比,细菌污染在细胞培养过程中“发病"更为迅速,较容易被发现。具体表现为:

  •   细胞培养基短期内变黄且浑浊(大量酸性物质累积)

  •   静置的培养液时不浑浊,但稍加震荡,就有许多浑浊物漂起

  •   可见培养液中有大量圆球状颗粒物漂浮

  •   细胞停止生长并有中毒表现,后出现大量死亡

  细菌污染鉴定
  简易方法:
  1、取少量培养液涂片染色检查,凭经验判断细菌种类。
  2、向肉汤培养基内滴入少量培养液
,置电热恒温培养箱内37 ℃培养以检测。

  细菌污染的祛除
  对于一般细胞:发生污染直接丢弃,并对环境进行消杀,紫外线灭菌、消毒液擦拭电热恒温培养箱、工作台等。

  对于重要且污染相对较轻的细胞:一般用抗生素的常用量的 5~10 倍作冲击疗法,用药 24~48 小时后再换常规培养液,需要注意的是:
  一旦发生污染后再使用抗生素常常难以祛除
有的抗生素只有抑菌作用而无杀菌效应。
且有研究表明,大量使用抗生素,或对细胞基因组产生影响。



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