用光照培养箱做种子发芽测定方法试验

       1．测定样品的提取用四分法从净度测定合格的纯净种子，每个三角形中数取25粒种子组成100粒，共组成四个100粒，即为四次重复，分别装入纱布袋中。

       2．消毒灭菌为了预防霉菌感染，干扰检验结果，检验所使用的种子和各种物件一般都要经过消毒灭菌处理。

       (1)检验用具的消毒灭菌：发芽盒、纱布、小镊子仔细洗净，并用沸水煮5～10分钟，供发芽试验用的发芽箱用喷雾器喷洒福尔马林后密封两三天然后使用。

       (2)种子的消毒灭菌：目前常用的药剂有福尔马林、高锰酸钾。药剂种类不同，处理的方法和时间也不一致。

福尔马林：将纱布袋连同其中的种子测定样品放人小烧杯中。注入0. 15%的福尔马林溶液以浸没种子为度，随即盖好烧杯。20分钟取出绞干，置于有盖的玻璃皿中闷30分钟，取出后连同纱布用清水冲洗数次，即可进行浸种处理。

高锰酸钾：用0.2%～0.5%的高锰酸钾溶液浸2小时，取出用清水冲洗数次。

       3．浸种多数药用植物种子不必浸种处理，但是如落叶松、马尾松、侧柏、黄连木、胡枝子等，用始温为45℃水浸种24小时，刺槐种子用80～90℃热水浸种，待水冷却后放置24小时，浸种所用的水最好更换1～2次。

       4．发芽床的准备发芽床是为种子发芽和发芽初期幼苗生长发育提供衬垫的发芽基质。发芽床种类较多，但标准发芽实验主要选用的是纸床和沙床。土壤或其他介质不宜用作初次试验的发芽床。

       纸床多用于中小粒种子的发芽试验，要求具有一定的强度、质地好、吸水性强、保水性好、无毒无菌、清洁干净，不含可溶性色素或其他化学物质，pH值为6.0～7.5。

       可以用滤纸、吸水纸等作为纸床。

       有纸上或纸间两种置种方式。纸上是将两层或多层纸放于透明的培养皿，发芽盘或塑料盒里，然后将种子放在充分湿润的纸上盖好盖子，放入发芽箱或发芽室进行发芽试验。

       纸间方法有盖纸法和纸巾卷法等几种使用方法。盖纸法：先将种子放在两层湿润纸上，然后再在上面轻轻盖上1层湿润纸；纸巾卷法：先将种子均匀排列在一层或两层湿润纸上，在种子上面盖上1层同样大小的湿润纸，然后卷成筒状，两端用橡皮筋绑好，放于保湿盒里或塑料袋内，平放或立放发芽。

       沙床要求沙粒大小均匀，其直径为0. 05～0. 80mm。无毒无菌无种子。持水力强，pH为6.0～7.5。使用前必须进行洗涤和高温消毒。

       化学药品处理过的种子样品发芽所用的沙子，不再重复使用。

       沙床也有沙上或沙中两种置种方式。沙上是把种子压入厚2～3cm湿润沙的表层；沙中则是将种子播在厚2～4cm的湿沙上，再按种子大小覆盖上一层12cm厚度的湿沙。

       注意：发芽床、培养皿等用具使用前应洗净或消毒。

       5．置床将经过消毒灭菌、浸种的种子安放到发芽床上。每个发芽盒床上整齐地安放1个重复的种子，种粒之间保持的距离大约相当于种粒本身的1～4倍，以减少霉菌感染，种粒的排放应有一定的规则，此外，要求每粒种子均充分接触水分，从而使其吸水一致，发芽整齐。在发芽盒不易磨损的地方贴上小标签，写明送检样品号、重复号、姓名和置床日期，然后将发芽盒盖好放入能调控温度、光照的光照培养箱内。

       6．管理经常检查测定样品及其水分、通气、温度、光照条件。发芽所用温度执行GB2772-1999中的规定。轻微发霉的种粒可以拣出用清水冲洗后放回原发芽床。发霉种粒较多的要及时更换发芽床或发芽容器。

       7．观察记载发芽测定的情况要定期观察记载。观察记载的间隔时间根据不同药用植物和样品情况自行确定，但初次记数和末次记数必须有记载。

发芽测定持续时间为末次计数天数，自置床之日起算，不包括预处理时间。

记载项目按发芽床的编号依次记载以下各点

       8．计算发芽率和发芽势

       发芽率(%)=(n／N)×100%

       式中：n为最终达到的正常发芽粒数；N为供试种子数。

       发芽率按组计算，然后计算四组的算术平均值。

       发芽势(%)=(n／N)×100%

       式中：n为规定时间内正常发芽粒数；N为供试种子数。