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师姐收藏的细胞培养小技巧

更新时间:2023-06-09  |  点击率:431


1. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天最好更换一次培养基。

2. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。

3. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。

4. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。

操作方面

1. 最好不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套。自己的东西自己包自己烘干。枪头什么的只要有可能污染就换。

2. 严格无菌操作。操作台一定要摆个酒精灯,所有操作紧密围绕在酒精灯周围进行。离开过操作台的东西再进操作台之前一定要用酒精消毒一遍,稍微烤一下,别直接放到火上,离一段距离。包括一切实验耗材、仪器、以及你带着手套的手。

3. 水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,记得要勤换。身体的各个部分尽量的少接触不需要接触的地方的地方。比如实验台,又比如培养箱内部。培养箱隔一段时间用酒精棉擦洗一次。

4. 细胞房日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸。晚上离开的时候最好给细胞房照紫外,超净台是用完就开。最好是同一时间就你一个人在细胞房养细胞。

5. 动作要既轻柔又有力。动作太重会有一堆一堆的气泡,动作太轻就吹不下来。刚开始的时候吹细胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后来就是吹的时候枪里的培养基不要一次全都压出来,留一点,枪的最头部尽量深的在液面以下。




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