凝胶电泳用的脱色摇床,主要是在电泳结束后对凝胶进行染色、脱色和洗涤时,提供持续、温和、均匀的振荡。它能让染色液或脱色液不断流过凝胶表面,加速染料渗入和背景脱除,同时避免用手摇晃造成凝胶破裂或染色不均。
具体用途:
SDS-PAGE蛋白胶:考马斯亮蓝染色后,用脱色液摇动脱去背景,使蛋白条带清晰。
琼脂糖凝胶:EB或其他核酸染料染色后,摇动洗涤,降低背景荧光。
银染、免疫染色等:也需要在摇床上进行孵育和洗涤。
怎么用(以SDS-PAGE考马斯亮蓝染色为例):
电泳结束后,小心取下凝胶,放入干净的培养皿或染色盒中。
加入染色液,液体要浸没凝胶,避免凝胶露出液面。
将染色盒放在脱色摇床托盘上,可用防滑垫或少量水固定。设置低速,一般30~60 r/min,摆幅温和即可,不要开高速。
室温摇动染色,考马斯亮蓝通常30分钟至2小时,也可过夜。具体时间看染色液浓度和凝胶厚度。
回收染色液,加入脱色液(如甲醇:冰乙酸:水=5:1:4或按说明书)。继续在摇床上低速摇动。
每隔20~30分钟更换一次脱色液,直到凝胶背景变浅、条带清晰。也可脱色过夜。
脱色完成后,将凝胶放在白光或凝胶成像仪上观察、拍照。
琼脂糖凝胶(核酸)用法类似:
电泳后放入EB或其他核酸染料中染色10~30分钟,再放入水中或缓冲液中脱色/洗涤,同样在脱色摇床上低速摇动。
注意EB等有毒染料需戴手套操作,废液按规定处理。
注意事项:
转速要低,通常不超过60 r/min,以液体轻微晃动、不溅出为准。
凝胶必须浸没,避免干涸或折叠。
容器要放稳,防止摇动时滑动。
使用有毒染料时,托盘可铺保鲜膜或吸水纸,防止污染设备。
实验结束及时清理残液,保持摇床清洁。

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