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细胞增殖-毒性检测实验步骤
发布时间:2019-04-04   点击次数:576次

CCK8试剂盒,是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面培养箱&试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤

方法/步骤

  1. 在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在电热恒温培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
  2. 向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
  3. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
  4. 向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。

5. 将培养板在电热恒温培养箱内孵育 1-4 小时。

  1. 用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
  2. 如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μl 0.1 M HCl溶液或者1%w/vSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。


 

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