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碱性蛋白酶
发布时间:2019-04-25   点击次数:194次

         喆图小编来给大家讲讲实验目的如酶类的生产,建立合适、的筛选模型,并从特定的样品如海泥中筛选出高产菌株。
实验所需仪器设备:灭菌锅,电热恒温培养箱,恒温摇床,玻璃仪器
         需准备的培养基 A.富集培养基(液体):海水2216E 液体培养基、蛋白胨5.0,酵母粉1.0,陈海水1L,pH7.6。取50mL 分装250mL 三角瓶后,8层纱布封口,外包1层牛皮纸, 115℃高温灭菌30min。 B. 2216E 斜面(固体):
         海水2216E 液体培养基中加入2%的琼脂粉,加热溶化琼脂,每支试管内加入5mL,115℃高温灭菌30min,灭菌后摆斜面。

无菌生理盐水:NaCl 0.85% 去离子水配制。每支试管加入4.5mL,盖上试管帽、包扎、115℃高温灭菌30min。
         碱性蛋白酶筛选培养基:海水2216E-脱脂奶粉平板:

     A:4%脱脂奶粉,蒸馏水;

     B:海水2216E 液体培养基中加4%琼脂粉,pH10.0。A 和B 115℃高温灭菌30min 后稍冷却,将A在无菌超净台中倒入B中,摇匀后倒入无菌平板。

         取少量海泥样品加入富集培养基中,28℃,150rpm 于恒温振荡培养24个小时。

         摇匀富集后的富集培养液,用无菌生理盐水作梯度稀释至10-5、10-6后各涂1个筛选平板, 在28℃电热恒温培养箱中培养48 小时。
         产蛋白酶菌株的筛选
         观察筛选平板上所产生的水解圈,拍照。每组选取1株水解圈大而明显的菌株,接在斜面上培养。

         以上内容仅供参考,如需了解详情请联系喆图客服!

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