菌种的诱变育种

         喆图小编以紫外线处理产蛋白酶的海洋细菌，通过透明圈法初筛，选择蛋白酶活力高的菌株。

实验材料及设备

         产蛋白酶菌株、超净工作台、电磁力搅拌器、低速离心机、培养皿、涂布器、10mL 离心管、吸管、250mL三角瓶、恒温摇床、电热恒温培养箱、直尺、棉签、橡皮手套。

培养基和试剂
         1、无菌生理盐水、75%酒精

         2、筛选培养基：脱脂奶粉培养基

         3、 海水2216E 液体培养基

实验步骤

         1. 出发菌株移接新鲜斜面培养基，于28℃恒温培养箱恒温培养24h；
         2. 将活化后的菌株接种于液体2216E 培养基，于28℃ 恒温培养摇床150rpm 振荡培养12h；
         3. 取1ml培养液于5ml离心管中，10000rpm 离心5min，弃去上清液，加1ml无菌生理盐水，重新悬浮菌体，再离心，弃去上清，重复上述 步骤用1ml生理盐水恢复成菌悬液；
         4. 将1ml上述菌悬液倒入无菌空平板中，再加入10ml无菌生理盐水，磁力搅拌1min。 
         5. 将紫外灯打开，预热30min；
         6．打开无菌平板盖，紫外照射处理60s，照射完毕后先盖上平板盖，再关闭搅拌和紫外灯；
         7.取处理过的菌悬液0.1ml涂布1个筛选平板；
         8.将诱变菌液在恒温培养箱28℃黑暗中培养过夜，然后在红灯下稀释涂菌进行初筛（避光培养），观察在菌落周围出现的透明圈大小。

         以上内容仅供参考，如需了解详情请联系喆图客服！