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原花青素值的测定方法
发布时间:2019-05-14   点击次数:82次

        方法提要样品经甲醇溶解后,采用紫外 - 可见分光光度计法测定。

        仪器和用具

        分析天平,感量为 0.01mg。

        紫外 - 可见分光光度计。

        超声波清洗器

        顶空瓶和压盖器

        试剂和溶液

        甲醇,分析纯。

        盐酸,分析纯。

        正丁醇(n-BuOH),分析纯。

        硫酸铁铵,分析纯。

        水。

        65% 盐酸 - 正丁醇(V/V)溶液:在一个 100mL 容量瓶中加入大约 2/3 体积的正丁醇,量取 5.0mL盐酸加入,放冷至室温,并用正丁醇定容至刻度,摇匀。溶液可稳定保存一个月。

        72% 硫酸铁铵溶液:精确称取 2.0g 硫酸铁铵,置 100mL 容量瓶中,加入 2mol/L 盐酸溶解,放冷至室温,用 2mol/L 盐酸定容至刻度,摇匀。溶液可稳定保存 6 个月。

        操作方法

        供试品溶液制备精密称取供试品约 10mg,置于 100mL 棕色容量瓶中,加入 80mL 甲醇,超声溶解,用甲醇定容至刻度,摇匀,即得供试品溶液。

        测定方法

        精密移取下列溶液至 10mL 顶空瓶中

        1.0mL 供试品溶液;

        6.0mL 5% 的盐酸 - 正丁醇溶液;

        0.2mL 2% 硫酸铁铵溶液;

        盖上顶空瓶的盖和垫,用压盖器(封口钳)封口,将顶空瓶放于水浴(100±2°C)锅中(瓶中试剂部分应处于水面以下),水浴 40 分钟,取出,在冷水浴(2 ~ 10°C)中迅速冷却 20 分钟。

        试剂空白:照上述方法精密移取 1mL 甲醇,6mL 盐酸 - 正丁醇和 0.2mL 硫酸铁铵溶液于 10mL 顶空瓶中,同法制备一个试剂空白。

        用试剂空白作对照,在 546nm 处测定供试品溶液的吸光度 。

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