原花青素值的测定方法

        方法提要样品经甲醇溶解后，采用紫外 - 可见分光光度计法测定。

        仪器和用具

        分析天平，感量为 0.01mg。

        紫外 - 可见分光光度计。

        超声波清洗器

        顶空瓶和压盖器

        试剂和溶液

        甲醇，分析纯。

        盐酸，分析纯。

        正丁醇（n-BuOH），分析纯。

        硫酸铁铵，分析纯。

        水。

        65% 盐酸 - 正丁醇（V/V）溶液：在一个 100mL 容量瓶中加入大约 2/3 体积的正丁醇，量取 5.0mL盐酸加入，放冷至室温，并用正丁醇定容至刻度，摇匀。溶液可稳定保存一个月。

        72% 硫酸铁铵溶液：称取 2.0g 硫酸铁铵，置 100mL 容量瓶中，加入 2mol/L 盐酸溶解，放冷至室温，用 2mol/L 盐酸定容至刻度，摇匀。溶液可稳定保存 6 个月。

        操作方法

        供试品溶液制备精密称取供试品约 10mg，置于 100mL 棕色容量瓶中，加入 80mL 甲醇，超声溶解，用甲醇定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

        测定方法

        精密移取下列溶液至 10mL 顶空瓶中

        1.0mL 供试品溶液；

        6.0mL 5% 的盐酸 - 正丁醇溶液；

        0.2mL 2% 硫酸铁铵溶液；

        盖上顶空瓶的盖和垫，用压盖器（封口钳）封口，将顶空瓶放于水浴（100±2°C）锅中（瓶中试剂部分应处于水面以下），水浴 40 分钟，取出，在冷水浴（2 ～ 10°C）中迅速冷却 20 分钟。

        试剂空白：照上述方法精密移取 1mL 甲醇，6mL 盐酸 - 正丁醇和 0.2mL 硫酸铁铵溶液于 10mL 顶空瓶中，同法制备一个试剂空白。

        用试剂空白作对照，在 546nm 处测定供试品溶液的吸光度 。