热门词:恒温培养箱马弗炉|网站首页|在线留言|联系我们

欢迎来到上海喆图科学仪器有限公司

上海喆图科学仪器有限公司

上海喆图科学仪器有限公司

产品分类展示

生化培养箱

霉菌培养箱

恒温恒湿培养箱

光照培养箱

人工气候箱

二氧化碳培养箱

多功能二氧化碳培养箱

电热恒温培养箱

隔水式恒温培养箱

鼓风干燥箱

立式鼓风干燥箱

高温鼓风干燥箱

真空干燥箱

数显真空度干燥箱

热空气消毒箱/干烤灭菌器

干燥培养两用箱

电热恒温水槽

电热恒温水浴锅

低温恒温槽

电热恒温加热板

一体式马弗炉

气浴恒温振荡器

恒温振荡器

低温培养箱

恒温恒湿箱(专业型)

厌氧培养箱

冷阱

精密鼓风干燥箱

远红外干燥箱

箱式电阻炉

陶瓷纤维马弗炉

药品稳定性试验箱

高低温(交变)试验箱

高低温(交变)湿热试验箱

培养摇床

数显石墨加热板

水浴恒温振荡器

恒温恒湿称重系统

熔喷布烘箱

联系我们

上海喆图科学仪器有限公司
上海喆图科学仪器有限公司

电话:021-80158181-103

传真:021-58582778-8002

QQ:123417331

E-MAIL:jiangjinhong@zhetu.cn

手机:17321198802

地址:上海市浦东新区瑞庆路528号18幢(张江高科现代医疗器械园)

您现在位置:首页 » 技术文章
细胞培养的设施器材与过程
发布时间:2019-05-16   点击次数:230次

        一、细胞培养需要的设施器材

        设施:超净台、恒温培养箱、倒置显微镜、液氮储存罐、电热鼓风干燥箱、冰柜、电子天平、恒温水浴槽、离心机、压力蒸汽消毒器。

        器材:

⒈玻璃器材

培养皿、滴流瓶、刻度吸管、离心管、培养瓶、烧杯、量筒、三角烧瓶

⒉塑料器材

多孔培养板、培养皿、培养瓶

⒊橡皮器材

橡皮制品(建议是硅制品)做各种瓶或试管的塞子、盖子。

⒋金属器材

剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头

⒌其他物品

纱布、注射器和针头

        二、细胞培养的一般过程

        ⒈准备工作

        准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。

        ⒉取材

        在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成年个体的组织容易培养,分化程度低的组织比分化高的容易培养,肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理,尽快培养,因故不能马上培养时,可将组织块切成黄豆般大的小块,置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌,同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌,为减少污染可用抗菌素处理。由组织并分离分散细胞的方法可参阅有关文献。

        ⒊培养

        将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养箱中,使细胞尽早进入生长状态。正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次,观察的内容包括细胞是否生长良好,形态是否正常,有无污染,培养基的PH是否太酸或太碱(由酚红指示剂指示),此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期(数小时到数十天不等),在潜伏期细胞一般不分裂,但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养,将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代,而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质,也可能仅有不死性(Immortality)而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。

        ⒋冻存及复苏

        为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度—-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,MAX终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。

分享到:

返回列表 | 返回顶部
收缩
  • QQ咨询

  • 在线咨询
  • 点击这里给我发消息
  • 点击这里给我发消息
  • 点击这里给我发消息

化工仪器网

推荐收藏该企业网站