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烟粉虱寄生蜂寄主竞争实验
发布时间:2021-07-13   点击次数:147次

实验设备

 

温室

养虫笼(40 cm × 50 cm × 60 cm)

体视解剖镜(Motic 140)

昆虫针

塑料培养皿(直径815 cm)

数码相机

医用注射器


实验材料

 

1. 供试植物:盆栽西红柿

2. 供试昆虫:B型烟粉虱,丽蚜小蜂,浅黄恩蚜小蜂


实验步骤

 

1. 供试昆虫的培养

    (1) 烟粉虱经室内分子检测确认为B 型,室内用西红柿饲养,将西红柿苗(25 cm 高) 接烟粉虱24 h 后置于养虫笼(40 cm × 50 cm × 60 cm) 内,待烟粉虱生长到一定时间后,取带柄的叶片,用脱脂棉包裹叶柄基部,在体视解剖镜下挑除不需要的若虫,仅保留3龄末和4 龄初若虫供试验用;

    (2) 丽蚜小蜂和浅黄恩蚜小蜂室内用烟粉虱繁殖多代。蜂发育到黑蛹期时将其从叶片上用昆虫针挑下放入铺有湿润滤纸的塑料培养皿(直径815 cm) 内备用。

2. 产卵器长度及卵大小的测量及待产卵量统计

    (1) 在内置测微尺的体视解剖镜下(Motic 140) 解剖羽化24 h 内的雌蜂,测量雌蜂的产卵器及后足胫节长度,查数待产卵数量并测量卵尺寸(长×宽) ;

    (2) 将羽化后的雌蜂引入(浅黄恩蚜小蜂引入雌雄蜂) 塑料培养皿内,供以5 %蜂蜜水,同时内置叶柄包裹有湿润棉球的西红柿叶片,25 ℃下至第5 天解剖检查雌蜂体内的待产卵量。根据羽化蜂的多少,每批解剖5~20 头,解剖3 批。

3. 产卵行为的观察

    (1) 在Motic 解剖镜下观察蜂的产卵行为并记时,寄生蜂触角接触到烟粉虱若虫开始,到检测完成调转身体准备将产卵器插入寄主体内的时间记为寄主检测时间;

    (2) 记录寄生蜂检测过程中的行为,以检测圈数进行统计,产卵器插入到拔出的时间记为产卵时间。

4. 发育历期的比较

    (1) 取干净无虫的西红柿苗放置于饲养烟粉虱的环境中,12 h 后取出,吹干净上面的烟粉虱成虫后将苗置于无虫的养虫笼内室温条件下饲养,湿度70 %左右;

    (2) 待烟粉虱若虫发育至3 龄后取叶片,保持叶片有4 龄初若虫虫量大约20 头,挑除其余若虫,用数码相机拍照后打印出来供标记用,然后将叶柄基部用脱脂棉包裹,用医用注射器吸取一定的水注入脱脂棉中;

    (3) 将叶片放入培养皿内(直径: 815 cm) 引入一头雌蜂(浅黄恩蚜小蜂为交配过的雌蜂,交配过的雌蜂会直接产卵在烟粉虱体内,而未交配过的雌蜂不会在烟粉虱体内产卵) ,观察其产卵行为,标记产卵寄生的寄主;

    (4) 每12 h 解剖无法从烟粉虱背部看到孵化的寄生蜂幼虫或卵的烟粉虱若虫10 头,观察寄生蜂的发育进度,对可以从背部观察到的,则直接记录。寄生蜂化蛹后每12 h 观察一次记录化蛹时间,最后统计羽化蜂的数量。每种蜂接蜂15 头,观察所有被寄生粉虱体内蜂的发育。

5. 两种蜂间的寄主竞争

    (1) 根据羽化雌蜂的待产卵量,每处理提供4 龄初烟粉虱若虫10 头(一张番茄叶片上) ,引入丽蚜小蜂和浅黄恩蚜小蜂雌蜂各一头,记为Ef Es 处理,同时设引入两头丽蚜小蜂(记为Ef Ef 处理) 或浅黄恩蚜小蜂(记为Es Es 处理) 为对照,放入光照培养箱中, 24 h 后去除蚜小蜂,解剖所有烟粉虱若虫,每处理重复25 次,分别记录每头寄主体内丽蚜小蜂和浅黄恩蚜小蜂的卵量。若某重复内供试烟粉虱被取食数量超过60 % ,则统计分析时剔除该重复。

6. 数据分析

    (1) 利用SAS910 对数据进行分析比较。两种蜂生物学特性数据的比较等用测验进行分析,竞争结果的数据分析中,若是两组数据,则采用测验进行分析比较; 对两组以上采用ANOVA 进行方差分析,然后采用Tukey’s HSD test 进行平均数之间的比较。


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