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粗脂肪的提取和定量测定
发布时间:2018-09-26   点击次数:926次

 喆图小编就来说说用索氏提取法测定粗脂肪含量的原理及操作,熟悉重量分析的基本步骤。

    实验原理 :脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物,能溶于脂溶性有机溶剂。  

    本实验利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性,用脂溶性溶剂将脂肪提取出来,借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行,通常使用的脂溶性溶剂为亿醚,或沸点为30℃~60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外,还有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等,故称为“粗脂肪”。同时,样品中结合状态的脂类(主要是脂蛋白)不能直接提取出来,所以该法又称为游离脂类定量测定法。  索氏抽提法测定脂肪大的不足是耗时过长,如能将样品先回流1~2次,然后浸泡在溶剂中过夜;次日再继续抽提,则可明显提高提取率。

    接下来喆图小编就来说说实验操作前的一些准备工作及步骤:

    将电热恒温水浴锅的水温事先加热(80℃)。务必保证提取管和烧瓶内干燥、洁净;若否,将其洗净并置于鼓风干燥箱内120℃烘干。

    1.折滤纸斗,取一张?11cm的滤纸,折成筒状,再将其一端折起来封死,便做成了滤纸斗。 

    2.称样:先将数粒花生仁去皮,在碾钵中用碾锤彻底捣碎作为实验样品。将滤纸斗在电子天平上称重,然后用药勺取2勺(约2g)样品装入滤纸斗中,把滤纸斗的开口处折起来封死;防止样品泄出滤纸斗。调整滤纸斗的高度,使其放在抽提管中时略低于虹吸管的上弯头处。将装好样品的滤纸斗放在电子天平上称重,两质量之差即为样品的质量。 

    3.提取:将索氏提取仪,从下至上安装。首先安装好烧瓶,并调整其高度,使其刚好能浸入电热恒温水浴锅中的水中。将装置从水浴锅的水中取出,继续安装提取管,把装有样品的滤纸斗放入提取管内,向提取管中缓缓倒入石油醚直至液面达到虹吸管上弯头部,正好虹吸一次;再向提取管中倒入石油醚,使其液面达到次液面的一半。用乳胶管将冷凝管与自来水管相连,将冷凝管安装到提取管上,检查一下,确保所有接口均对接完好(不漏气,不打滑)。轻轻打开自来水(冷凝用),将索氏提取仪整个装置放入电热恒温水浴锅中加热提取(水温80℃左右)。提取时间2~4h,约虹吸20次以上,记录每次虹吸所需的时间和虹吸次数。附注:若要将样品的粗脂提取完全,提取时间至少为12h以上。由于实验时间的限制,我们的提取率只能达到80%左右。  

    4.回收石油醚:提取2h后,当石油醚在提取管中的液面即将达到虹吸管的上弯头处时,从电热恒温水浴锅中取出索氏提取仪装置,室温冷却5~10min;取下平底烧瓶,将提取管的下端口插入回收瓶中,倾斜装置,提取管中的石油醚会虹吸而流入回收瓶中,达到回收的目的。再装上平底烧瓶,继续放入电热恒温水浴锅中加热直至冷凝管下端无石油醚滴下,表明平底烧瓶中的石油醚已经蒸干。注意:必须蒸干后才能放入鼓风干燥箱烘干,否则会引起火灾。取下平底烧瓶,回收提取管中的石油醚。  

    5.称量粗脂质量:将平底烧瓶放入120℃的鼓风干燥箱中烘15min,取出冷却后称重(须戴手套,以免烫伤)。再将平底烧瓶用洗涤剂洗净,于120℃的鼓风干燥箱中烘干(约15min),取出冷却后称重,两者的质量之差就是粗脂的质量。  

   清洁 

   从提取管中取出滤纸斗,清洗提取管,整理好桌面上的仪器和试剂,并注意清洁自己的操作台。  

   计算 

   样品粗脂的含量(%)=(粗脂的质量/样品的质量)*100%

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