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枸杞多糖测定
发布时间:2019-05-06   点击次数:364次

        枸杞子,为茄科植物枸杞的成熟果实。夏、秋果实成熟时采摘,除去果柄,置阴凉处晾至果皮起皱纹后,再暴晒至外皮干硬、果肉柔软即得。遇阴雨可用干燥箱烘干。

        枸杞子具有多种保健功效,是卫生部批准的药食两用食物。适量食用有益健康,配合菊枸茶有清肝明目的效果。

        原理
        用80%乙醇溶液提取以除去单糖、低聚糖、甙类及生物碱等干扰性成分,然后用水提取其中所含的多糖类成分。多糖类成分在硫酸作用下,先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后和苯酚缩合成有色化合物,用分光光度法于适当波长处测定其多糖含量。
        仪器和设备
        实验室用样品粉碎机。
        分析天平,感量0.0001g.
        分光光度计,用10mm比色杯,可在490nm下测吸光度。
        玻璃回流装置。
        电热恒温水槽
        现玻璃仪器,250mL容量瓶、各规格移液管、25mL具塞试管。
        试剂配制
        除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的至少三级的水。
180%乙醇溶液:用95%乙醇或无水乙醇加适量水配制。
        硫酸。
        苯酚液:取苯酚100g,加铝片0.1g与碳酸氢钠0.05g,蒸馏收集172℃馏分,称取此馏分10g,加150mL,置于棕色瓶中即得。
        试样的选取和制备
        取具有代表性试样200g,用四分法将试样缩减至100g,粉碎至均匀,装于袋中置干燥皿中保存,防止吸潮。
        测定步骤
样品溶液的制备

        准确称取样品粉末0.4g(到0.0001g),置于圆底烧瓶中,加80%乙醇溶液200mL,回流提取1h,趁热过滤,烧瓶用80%热乙醇溶液洗涤3次~4次,残渣用80%热乙醇溶液洗涤8次~10次,每次约10mL,残渣用热水洗至原烧瓶中,加水100mL,加热回流提取1h,趁热过滤,残渣用热水洗涤8次~10次,每次约10mL,洗液并入滤液,冷却后移人250mL容量瓶中,用水定容,待测。
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        GB/T18672一2014
        标准曲线的绘制
        准确称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖0.1g(到0.0001g),加水溶解并定容至1000mL。准确吸取此标准溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL分置于具塞试管中,各加水至2.0mL,再各加苯酚液1.0mL, 摇匀, 迅速滴加硫酸5.0mL, 摇匀后放置5min, 置沸水浴中加热15min, 取出冷却至室温; 另以水2mL加苯酚和硫酸,同上操作为空白对照,于490nm处测定吸光度,绘制标准曲线。
        试样的测定
        准确吸取待测液一定量(视待测液含量而定),加水至2.0mL,以下操作按标准曲线绘制的方法测定吸光度,根据标准曲线查出吸取的待测液中葡萄糖的质量。

 

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